海克隆胎牛血清的使用所產(chǎn)生的常見問題

由于血清營養(yǎng)豐富，貯存條件特殊，因此在貯存和使用過程中容易產(chǎn)生以下問題：

1、改變培養(yǎng)液的pH值

海克隆胎牛血清的pH理論值為7.0～8.0，培養(yǎng)基在加入規(guī)定量的碳酸氫鈉后（即達(dá)到細(xì)胞生長所需要的滲透壓），再加入10％的海克隆胎牛血清，一般會使培養(yǎng)液的pH值發(fā)生改變。因此在使用過程中應(yīng)注意pH的變化，如有必要可用1mol/L NaOH或1mol/L HCl調(diào)pH到所需值。

 

2、由于海克隆胎牛血清的營養(yǎng)成分豐富，非常適合細(xì)菌、真菌和支原體等生長。海克隆胎牛血清大部分采用手工分裝，因此容易把微生物帶入而使得血清被污染。使用前如果沒有及時發(fā)現(xiàn)，將會把污染物帶入正在培養(yǎng)的細(xì)胞中，而使得細(xì)胞不能正常生長。

 

3、海克隆胎牛血清在貯存解凍過程中會產(chǎn)生沉淀，這是由于海克隆胎牛血清中含有大量脂蛋白、纖維蛋白及多肽類物質(zhì)，在-15℃冷凍保存解凍后就會自然形成沉淀，隨著保存時間的延長，沉淀量會增加。因此在融化血清時一般應(yīng)先在4℃放置使之解凍，然后放在室溫使血清*融化，以避免沉淀的增加。添加海克隆胎牛血清時應(yīng)避免把沉淀加入培養(yǎng)液，否則由于沉淀的存在會使得所培養(yǎng)的細(xì)胞產(chǎn)生大量黑點，或者細(xì)胞表面將會覆蓋一層油狀物質(zhì)，影響細(xì)胞的正常生長。為減少海克隆胎牛血清的損失，可以把有沉淀的血清收集起來進行離心處理，將上清液加入培養(yǎng)液使用（一般不建議采用過濾的方法除去沉淀，因為沉淀會堵塞濾膜而無法過濾）。